O estudo dos extratos dos galhos da planta Spiranthera odoratissima St. Hil. (Rutaceae) levou ao isolamento de alcalóides furoquinolínicos (dictamina, γ-fagarina e esquimianina) e 2-arilquinolin-4-ona (2-fenil-1-metilquinolin-4-ona) e limonóides (ácido limonéxico e limonina). Os compostos 2-fenil-1-metilquinolin-4-ona e ácido limonéxico foram isolados pela primeira vez no gênero Spiranthera. Os alcalóides furoquinolínicos, 2-arilquinolin-4-ona e os limonóides mostraram atividade inseticida e/ou fungicida no ninho da formiga Atta sexdens rubropilosa.

The study of the Spiranthera odoratissima St. Hil (Rutaceae) branches extracts led to the isolation of the furoquinoline (dictamine, γ-fagarine and skimmianine) and 2-arylquinoli-4-one (1-methyl-2-phenylquinolin-4-one) alkaloids and limonoids (limonexic acid and limonin). The compounds 1-methyl-2-phenylquinolin-4-one and limonexic acid were isolated for the first time from the Spiranthera. These furoquinoline and 2-arylquinoli-4-one alkaloids and limonoids showed insecticidal and/or fungicidal activity in the nest of the Atta sexdens rubropilosa.

O fluído fecal (FF) e a secreção da glândula mandibular (MGS) de operárias da formiga cortadeira Atta sexdens rubropilosa Forel afetaram a germinação dos esporos de microfungos isolados dos formigueiros. MGS foi mais eficiente que FF, inibindo quatro espécies de microfungos dentre as seis estudadas.

The mandibular gland secretion (MGS) and the faecal fluid (FF) of the leaf-cutting ant Atta sexdens rubropilosa Forel affected the spore germination of selected microfungi isolated from nests of this insect. MGS was more effective than the FF, completely inhibiting the spore germination of four out of six microfungi species.

Nove limonóides foram isolados de Carapa guianensis e Cedrela fissilis. Entre eles, a 1,2-diidro-3beta-hidroxi-7-desacetoxi-7-oxogedunina é uma substância inédita. Além disso, alguns deslocamentos químicos da xilocensina k foram corrigidos e os dados de RMN ¹H da 7-desacetilgedunina são descritos pela primeira vez na literatura. Seis dos limonóides isolados foram submetidos a ensaios com formigas Atta sexdens rubropilosa e apresentaram atividade inseticida moderada.

Nine limonoids were isolated from Carapa guianensis and Cedrela fissilis. Among them, 1,2-dihydro-3beta-hydroxy-7-deacetoxy-7-oxogedunin is a new compound. Moreover, the assignments of some chemical shifts of xyloccensin k have been corrected and ¹H NMR data of 7-deacetylgedunin have been assigned for the first time. These isolated limonoids were assayed on Atta sexdens rubropilosa workers showing moderate insecticidal activities.

O estudo químico dos frutos de Cipadessa fruticosa (Meliaceae) permitiu o isolamento dos limonóides cipadesina B (inédito) e swietemahonolídeo. Das raízes de Cedrela fissilis (Meliaceae) foi isolado o limonóide 3beta-acetoxicarapina, inédito como produto natural, juntamente com os triterpenos ácido oleanólico e ácido oleanônico. Estes compostos, e outros seis mexicanolídeos anteriormente isolados de C. fruticosa, apresentaram atividade inseticida para as formigas cortadeiras Atta sexdens rubropilosa.

The chemical investigation of the fruits of Cipadessa fruticosa (Meliaceae) afforded the new limonoid cipadesin B and the known swietemahonolide. From the roots of Cedrela fissilis (Meliaceae) were isolated the limonoid 3beta-acetoxycarapin, new as natural product, along with the triterpenes oleanolic and oleanonic acid. These compounds and other six mexicanolide limonoids previously isolated from C. fruticosa showed insecticidal activity against the leaf-cutting ants Atta sexdens rubropilosa.

Formigas cortadoras de folhas são consideradas pragas para a agricultura devido à grande quantidade de material vegetal utilizado por elas para cultivar um fungo simbionte que lhes serve de alimento e enzimas. O mutualismo entre o fungo e as formigas é um ponto a ser explorado quando se considera sua possível aplicação em métodos alternativos para o controle desses insetos. Sabendo-se que algumas plantas são naturalmente resistentes aos insetos fitófagos, alguns produtos naturais (metabólitos secundários) devem ser avaliados em relação às suas propriedades inseticidas e/ou fungicidas. Neste trabalho foram isoladas oito cumarinas de quatro espécies de plantas e o efeito no desenvolvimento do fungo simbionte das formigas cortadeiras Atta sexdens foi determinado. Com exceção da clausarina, todas as outras cumarinas foram inibitórias de 64 µg mL-1 à 80 µg mL-1 sendo que a xantiletina inibiu o fungo na concentração de 25 µg mL-1.

Leaf-cutting ants are known to be a serious pest for agriculture due to the high amounts of vegetal matter from crops used by them in order to cultivate a symbiotic fungus on which they rely for food and enzymes. The mutualism between the fungus and the ants is a point to be explored when alternative methods of control are being thought of. Considering that some plants are naturally resistant to phytophagous insects, some natural products (secondary metabolites) should be evaluated with respect to their insecticide and/or fungicide properties. In this paper we isolated eight coumarins from four different plant species and we determined their effect on the development of the symbiotic fungus of the leaf-cutting ant Atta sexdens. With the exception of clausarin, all the other coumarins were inhibitory from 64 µg mL-1 through 80 µg mL-1 and xanthyletin inhibited the fungus at 25 µg mL-1

O isolamento e a manutenção de fungos basidiomicetos simbiontes de formigas da tribo Attini tem sido dificultado pela baixa velocidade de crescimento desses fungos, bem como pela presença de muitos microrganismos que vivem na superfície do material que as formigas mantêm no interior nos ninhos como substrato para o crescimento dos seus fungos simbiontes. No presente trabalho nós descrevemos um método que aumenta em mais de sete vezes a eficiência de isolamento desses fungos, quando comparada àquela obtida por procedimentos tradicionais. Ninhos subterrâneos de formigas atíneas dos gêneros Atta, Acromyrmex, Trachymyrmex e Mycetarotes foram localizados e deles foram coletadas amostras contendo fungos simbiontes e formigas, que foram transportadas para o laboratório, onde as formigas foram capazes de limpar a cultura do fungo e estimular o seu crescimento. Em seguida, porções dos micélios foram assepticamente coletadas e transferidas para meio Yeast Nitrogen Base contendo glicose e cloranfenicol. Para facilitar a manutenção dos isolados em culturas de laboratório, diferentes nutrientes foram analisados para a elaboração de um meio de cultivo complexo, que possibilitou aumentar a velocidade de crescimento dos fungos e estocá-los por longos períodos. O método foi aplicado com sucesso para os fungos simbiontes de todos os gêneros de formigas estudados, gerando, assim, um procedimento extremamente útil para a formação e manutenção de uma coleção representativa de diferentes fungos simbiontes de formigas da tribo Attini.

The isolation and maintenance of symbiotic basidiomycete fungi living in association with ants of the tribe Attini has been hindered by the slow growth rate of these fungi and the presence of other microorganisms on the surface of the material which the ants maintain inside their nests to provide a growth substrate for their symbiont. In this paper we describe a method which increases the efficiency of isolation of these fungal symbionts by over seven fold as compared to traditional isolation procedures. Underground nests of attine ants of the genera Atta, Acromyrmex, Trachymyrmex and Mycetarotes were located, from which samples containing the fungal symbiont and ants were collected and transported to the laboratory where the ants were able to clean the fungal culture and stimulate its growth. As the symbiotic fungus grew, portions of its mycelium were collected and transferred to solid Yeast Nitrogen Base culture medium containing glucose and chloramphenicol. To facilitate the maintenance of the isolates in laboratory cultures, several nutrients were tested to formulate a complex culture medium for fast fungal growth and long-term storage. We successfully applied this methodology to the fungal symbionts of all the ant genera studied, thus producing a useful tool for the creation and maintenance of a comprehensive collection of fungi symbiotic of ants in the tribe Attini.

Seeds Citrus oils (C. sinensis, C. limon and C. reticulata) extraction with hexane in a soxhlet apparatus and through supercritical fluid (CO2) were done. Besides triglycerides, the oils obtained with hexane comprised volatile compounds such as terpenes and fatty alcohols, esters, and aldehydes. However, the oils obtained by extraction with supercritical fluid presented only triglycerides. These results indicate that the extraction using supercritical fluid presents better selectivity. The activity of the oils on the development of the ant symbiotic fungus, Leucoagaricus gongylophorus, showed week activity and the topic insecticide assay showed better activity for the tangerine seed oil.

Foi observada, pela primeira vez no Brasil, a produção de centenas de formas aladas em formigueiros de Atta sexdens rubropilosa Forel, mantidos em laboratório. Larvas de último instar de machos foram encontradas em 5 de agosto de 2000 em um formigueiro com quase seis anos de fundação, contendo aproximadamente 110 L de esponja de fungo distribuída em 21 panelas. Entre 30 e 40 dias mais tarde apareceram larvas de fêmeas aladas. Os adultos sexuados apresentaram tamanhos compatíveis com os encontrados em formigueiros de campo. Foram observadas duas aparentes tentativas frustradas de revoada na última semana de outubro, após o que começaram a aparecer machos e fêmeas mortos no lixo do formigueiro.

The production of hundreds of reproductive forms of Atta sexdens rubropilosa Forel in nests maintained in laboratory was observed for the first time in Brazil. Last instar male larvae were found on August 5, 2000 in a six-year-old colony with approximately 110 L of fungus garden distributed in 21 pots. Thirty to forty days later, queen larvae started to be seen. The adult sexual forms were comparable in size with those found in the field. Two apparent failed attempts of a nuptial flight were observed during the last week of October, followed by the appearance of dead males and females in the garbage piles of the colony.

A investigação fitoquímica dos extratos de caules e folhas da espécie endêmica Raulinoa echinata Cowan, Rutaceae, levou ao isolamento de alcalóides furoquinolínicos (esquimianina, kokusaginina, maculina e flindersiamina) e quinolônicos (1-metil-2-n-nonil-4-quinolona, 2-n-nonil-4-quinolona e 2-fenil-1-metil-4-quinolona). Os alcalóides isolados mostraram atividade antifúngica contra Leucoagaricus gongylophorus, o fungo simbionte de formigas cortadeiras (Atta spp). Quando testados in vitro contra formas tripomastigotas de Trypanosoma cruzi, os alcalóides foram inativos ou parcialmente ativos. Neste trabalho descrevem-se o isolamento dos alcalóides, a elucidação estrutural dos alcalóides quinolônicos e a estrutura obtida por difração de raio-X da flindersiamina, juntamente com os resultados dos bioensaios realizados.

Phytochemical survey of stems and leaves extracts of the South Brazilian endemic plant Raulinoa echinata Cowan, Rutaceae, led to the isolation of known furoquinoline alkaloids: the widespread skimmianine; kokusaginine, maculine, flindersiamine, and also quinolone derivatives: 1-methyl-2-n-nonyl-4-quinolone, 2-n-nonyl-4-quinolone and 1-methyl-2-phenyl-4-quinolone. These alkaloids showed antifungal activity against Leucoagaricus gongylophorus; the symbiotic fungus of leaf-cutting ants (Atta sexdens). They were inactive or displayed weak inhibitory activity when assayed in vitro against trypomastigote forms of Trypanosoma cruzi. In this paper, the isolation, structure elucidation and bioactivity results of these compounds are reported together with the X-ray structure of flindersiamine.

Da casca do caule de Picramnia teapensis Tul. foram isolados dois novos benzoatos triterpênicos, o 3alfa,7beta-dibenzoato do ácido lup-20(29)-en-28-óico e o 7beta-benzoato do ácido 3alfa-hidroxi-lup-20(29)-en-28-óico. A elucidação estrutural desses compostos foi fundamentada na análise dos dados espectroscópicos. Outros compostos conhecidos, beta-sitosterol, estigmasterol, lupeol e epilupeol, foram identificados em mistura por CG-EM. Nenhum dos triterpenos benzoilados mostrou efeito inibitório no crescimento in-vitro do Leucoagaricus gongylophorus (Fisher), também citado como Leucocoprinus gongylophorus (Heim), syn Rozites gongylophora (Möller), o fungo simbionte cultivado pelas formigas cortadeiras de folhas Atta sexdens L.

Two new benzoic acid esters of triterpene alcohols [lup-20(29)-en-28-oic acid 3alpha,7beta-dibenzoate and 3alpha-hydroxy-lup-20(29)-en-28-oic acid 7beta-benzoate] were isolated from the stem bark of Picramnia teapensis Tul. The structures of these compounds were established on the basis of spectral analyses. Other known compounds, beta-sitosterol, estigmasterol, lupeol and epilupeol, were identified in mixture by GC-MS. The triterpene esters have not shown in-vitro inhibitory effect on the growth of Leucoagaricus gongylophorus (Fisher), referred also as Leucocoprinus gongylophorus (Heim), syn Rozites gongylophora (Möller), the symbiotic fungus cultivated by the leaf-cutting ant Atta sexdens L.

O fungo simbionte Leucoagaricus gongylophorus (Möller) Singer, sin. de Rozites gongylophora Möller, cultivado pela formiga cortadeira Atta sexdens L. teve seu desenvolvimento fortemente inibido por frações obtidas das folhas de gergelim, Sesamum indicum L. (Pedaliaceae). Total inibição foi observada na concentração de 2,5 mg/ml, sendo verificada inibição de 50% com algumas frações na concentração de 1,25 mg/ml. A análise cromatográfica do extrato hexânico revelou a ocorrência de uma mistura de ácidos graxos, onde os componentes majoritários foram os ácidos tetradecanóico, hexadecanóico, octadecanóico, icosanóico, docosanóico e 9,12,15 octadecatrienóico. A separação desses compostos durante as várias etapas do fracionamento resultou em perda ou diminuição da atividade inibitória sobre o fungo, indicando que a inibição observada pode ser consequência da ação conjunta de alguns dos compostos presentes nas folhas e não de uma única substância.

The symbiotic fungus Leucoagaricus gongylophorus (Möller) Singer (syn. Rozites gongylophora Möller) cultivated by the leaf-cutting ant Atta sexdens L. had its development strongly inhibited by crude extracts obtained from leaves of sesame, Sesamum indicum L. (Pedaliaceae). With most of the fractions from these extracts total inhibition was observed at 2.5 mg/ml, whereas inhibition of 50% was observed with some fractions at 1.25 mg/ml. Chromatographic analysis of the hexane extract showed that it was composed by a mixture of fatty acids, of which tetradecanoic, hexadecanoic, octadecanoic, icosanoic, docosanoic and 9,12,15 octadecatrienoic acids were the major components. The separation of these compounds during the different steps of purification resulted in no or lower inhibitory effect for most of these fractions, indicating that the inhibitory activity observed could be due to the joint action of these compounds present in the leaf tissue, rather than to the action of a single substance.

Avaliou-se dietas artificiais, para operárias médias de Atta sexdens rubropilosa Forel isoladas de formigueiros de laboratório e de campo. Os bioensaios foram realizados com 6 formigas/placa de Petri, sendo 10 placas/tratamento, em câmara ambiental a 24 ± 1 °C e UR > 70%. Não houve diferença na sobrevivência entre as operárias de laboratório e de campo, quando tratadas com dieta artificial líquida. Ao se comparar as dietas artificiais líquida e sólida, pode-se constatar que não houve diferença na sobreviência das operárias de laboratório tratadas com as diferentes dietas. A dieta artificial sólida com troca a cada 48 h, até 25 dias, representa uma alternativa para se trabalhar com operárias médias de A. sexdens rubropilosa, isoladas do formigueiro, em bioensaios de laboratório.

Artificial diets, were studied for medium sized workers of Atta sexdens rubropilosa Forel isolated from laboratory and natural ant-nests. The bioassays were undertaken with 6 ants/Petri dish, 10 dishes/test, in an environmental chamber at 24 ± 1 °C and 70% RH. The number of dead ants/dish was observed daily. Results showed that there was no difference among the laboratory and field workers when treated with the liquid artificial diet. The same was demonstrated when we compared the liquid diet to the solid one. Results demonstrated that the artificial solid diet, changed every 48 hours up to 25 days, was a suitable alternative to work medium sized workers of A. sexdens rubropilosa, isolated from the ant-nest in laboratory bioassays.